Comhcheanglaíonn taighdeoirí Ollannacha CRISPR agus bithluminescence i dtástáil thurgnamhach dogalair thógálacha

D'fhéadfadh próitéin oíche nuafhorbartha diagnóis galair víreasacha a bhrostú agus a shimpliú, de réir taighdeoirí san Ísiltír.
Déanann a staidéar, a foilsíodh Dé Céadaoin i Foilseacháin ACS, cur síos ar mhodh íogair, aon-chéim chun anailís a dhéanamh go tapa ar aigéid núicléacha víreasacha agus ar a gcuma ag baint úsáide as próitéiní gorm geal nó glasa geal.
Príomhstraitéis i ndiagnóisic chliniciúil, taighde bithleighis, agus monatóireacht ar shábháilteacht bia agus comhshaoil ​​is ea aithint pataiginí trína méarloirg aigéid núicléacha a bhrath.Tá na tástálacha imoibrithe slabhra polaiméaráise cainníochtúla (PCR) a úsáidtear go forleathan an-íogair, ach éilíonn siad ullmhúchán samplach sofaisticiúil nó léirmhíniú torthaí, rud a fhágann nach bhfuil siad praiticiúil i roinnt suíomhanna cúram sláinte nó suíomhanna teoranta ó thaobh acmhainní de.
Is toradh é an grúpa seo ón Ísiltír ar chomhoibriú idir eolaithe ó ollscoileanna agus ospidéil chun modh diagnóiseach aigéid núicléacha tapa, iniompartha agus éasca le húsáid a fhorbairt ar féidir a chur i bhfeidhm i suíomhanna éagsúla.
Bhí siad spreagtha ag flashes firefly, glows firefly, agus réaltaí beag bídeach fíteaplanctóin uisceach, iad go léir faoi thiomáint ag feiniméan ar a dtugtar bithluminescence.Is imoibriú ceimiceach a bhaineann leis an próitéin luciferase is cúis leis an éifeacht glow-in-the-dorcha.Ionchorpraíonn na heolaithe próitéiní luciferase i braiteoirí a astaíonn solas chun breathnóireacht a éascú nuair a aimsíonn siad sprioc.Cé go bhfágann sé seo go bhfuil na braiteoirí seo oiriúnach le haghaidh braite pointe cúraim, níl an íogaireacht ard atá de dhíth orthu le haghaidh tástálacha diagnóiseacha cliniciúla faoi láthair.Cé gur féidir leis an modh eagarthóireachta géine CRISPR an cumas seo a sholáthar, éilíonn sé go leor céimeanna agus trealamh speisialaithe breise chun an comhartha lag is féidir a bheith i láthair i samplaí casta, torannacha a bhrath.
D'aimsigh taighdeoirí bealach chun próitéin a bhaineann le CRISPR a chomhcheangal le comhartha bithluminescent is féidir a bhrath le ceamara digiteach simplí.Chun a chinntiú go raibh go leor RNA nó sampla DNA le haghaidh anailíse, rinne na taighdeoirí aimpliú polaiméaráise ath-chomhcheangail (RPA), teicníocht shimplí a fheidhmíonn ag teocht leanúnach timpeall 100 °F.D'fhorbair siad ardán nua ar a dtugtar Braiteoir Aigéad Núicléach Luminescent (LUNAS), ina bhfuil an dá phróitéin CRISPR/Cas9 sainiúil do chodanna éagsúla comhtheagmhálacha den ghéanóm víreasach, gach ceann acu le blúire luciferase uathúil ceangailte leo thuas.
Nuair a bhíonn an sainghéanóm víreasach atá á scrúdú ag na himscrúdaitheoirí i láthair, ceanglaíonn dhá phróitéin CRISPR/Cas9 leis an sprioc-seicheamh aigéid núicléigh;éiríonn siad i gcóngaracht, rud a ligeann do phróitéin luciferase slán solas gorm a fhoirmiú agus a astú i láthair foshraith cheimiceach..Chun cuntas a thabhairt ar an tsubstráit a itear sa phróiseas seo, d'úsáid na taighdeoirí imoibriú rialaithe a d'astú solas glas.Léiríonn feadán a athraíonn dath ó ghlas go gorm toradh dearfach.
Thástáil na taighdeoirí a n-ardán trí mheasúnacht RPA-LUNAS a fhorbairt, a bhraitheannSARS-CoV-2 RNAgan leithlisiú RNA tedious, agus léirigh sé a fheidhmíocht diagnóiseacha ar shamplaí swab nasopharyngeal óCOVID 19othair.D'éirigh le RPA-LUNAS SARS-CoV-2 a bhrath laistigh de 20 nóiméad i samplaí le ualach víreasach RNA chomh híseal le 200 cóip/μL.
Creideann na taighdeoirí gur féidir go leor víreas eile a bhrath go héasca agus go héifeachtach dá measúnú.“Tá RPA-LUNAS tarraingteach do thástáil galar tógálach pointe cúraim,” a scríobh siad.